鸡传染病支气管炎试剂盒_鸡气管炎抗体检测试剂盒

使用前，请务必仔细阅读说明书，如有不清楚的，请拨打24h技术支持专线：0714-6338558或18171667592/18108699172，咨询清楚再进行实验。

【产品名称】

通用名称：鸡传染性支气管炎病毒抗体检测试剂盒（ELISA）

英文名称：Test Kit for Antibodies to Infectious Bronchitis Virus（ELISA）

【包装规格】

 48T/盒，96T/盒

【预期用途】

本试剂用于检测鸡血清中传染性支气管炎病毒抗体，可用于鸡传染性支气管炎病毒抗体疫苗免疫效果评价。

【检验方法】

试剂准备

1、使用前，所有的组分都要至少复温2h，确保充分复温到室温。

2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水，按1:20稀释，即1份的浓缩洗涤液，添加19份的蒸馏水。

3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1体积充分混合，混合后10分钟内使用。

操作程序

1、所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。

2、按前面试剂准备中描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。

3、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。

4、设置阴阳性对照孔、样本孔，阴阳性对照孔各加对照品100μL，样本孔加稀释后样本100μL。

5、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

6、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复4次（共洗板5次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。

7、所有孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。

8、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复4次（共洗板5次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。

9、将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育10min。

   10、每孔加终止液50μl，混匀，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值），无参比波长用空白孔调零(即所有孔吸光值减去空白孔吸光值)。

【参考值】

实验正常的情况下，阴性对照≤0.12，阳性对照≥0.58。

【检验结果的解释】

1.样品A值≥0.37为阳性；样品A值在0.2到0.37之间为可疑；样品A值＜0.2为阴性。

2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。