无菌检查的所有操作均需在严格控制微生物污染的环境下进行，即在环境洁净度10000级和局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。无菌室应照明良好、避免潮湿、温度适宜、有内外压差、远离厕所和污染区；材料应耐受清洗、消毒，墙壁与天花板、地面连接处应承弧形连接，无缝隙死角；房间内预置进风与回风口，且风口无物品遮挡。

2.1照明灯应镶嵌在天花板内，室内光照充足且分布均匀，光照度不低于300lx。

2.2洁净区室内温度应控制在18-26℃，相对湿度应控制在45%-65%，实验前与实验中应留意观察是否符合要求。

2.3空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5Pa，洁净室与室外大气静压差大于10Pa。

2.4无菌区域应定期使用消毒剂清洁消毒（例如：0.1%的新洁尔灭、75%乙醇、84消毒剂等），重点清洁区域为进风口、回风口、墙壁拐角、地面缝隙、门把手、门缝等。

3.1定期检查进风、循环风高效完整性，避免出现泄露情况，影响实验结果。

3.2定期更换滤网，避免因滤网堵塞造成风量波动，影响压差。

3.3人员进出洁净区域房间，开关门应迅速，减少时间开关门时间，避免出现风量泄露，压差报警；关门必须关严，避免出现漏风情况，造成压差混乱；条件允许，可以使用自动门，设定开门时间、保持时间、关门时间，以此保证压差不受很大波动影响。