人EB病毒检测试剂盒_eb早期抗原IgM检测试剂盒_EB病毒IgM抗体试剂盒_eb病毒定性检测

 使用前，请务必仔细阅读说明书，如有不清楚的，请拨打24h技术支持专线：0714-6338558或18171667592/18108699172，咨询清楚再进行实验。

【产品名称】

通用名称：人EB病毒早期抗原IgM抗体(EBV EA IgM)定性检测试剂盒（ELISA）

英文名称：Human EBV EA IgM ELISA KIT

【包装规格】

48人份/盒，96人份/盒

【预期用途】

仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中是否含有人EB病毒早期抗原IgM抗体。

【检验原理】

本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被人EB病毒早期抗原IgM抗体抗原（固相抗原，货号：INS1021003C）的微孔酶标板中，加入人EB病毒早期抗原IgM抗体阴阳性性对照（货号：INS1021003J）和待测样本，温育洗涤，再加入另一株HRP标记的抗人EB病毒早期抗原IgM抗体抗体（酶标抗体，货号：INS1021003E），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗原-抗体-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人EB病毒早期抗原IgM抗体的浓度正相关，通过计算公式判断样品阴阳性。

【检验方法】

试剂准备

1、使用前，所有的组分都要至少复温2h，确保充分复温到室温。

2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水，按1:20稀释，即1份的浓缩洗涤液，添加19份的蒸馏水。

3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1体积充分混合，混合后15分钟内使用。

操作程序

1、所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。

2、按前面试剂准备中描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。

3、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。

4、设置阴阳性对照孔、样本孔，阴阳性对照孔各加对照品50μL，样本孔加样本50μL。

5、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

6、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复4次（共洗板5次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。

7、所有孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。

8、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复4次（共洗板5次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。

9、将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育15min。

   10、所有孔加入终止液50μL，在酶标仪上读取各孔吸光度（OD值）。

【检验结果的解释】

检测完成后，以阴性对照的OD+0.25，做为阈值，样本OD值大于阈值，为阳性；样本OD值低于阈值为阴性。